RNA病毒基因组提取试剂盒 SGGGO金山科研平台 R0903

2023-07-30

RNA病毒基因组提取试剂盒 品牌SGGGO QQ:1749072012 R0903

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RNA/DNA病毒基因组提取试剂盒

试剂盒组成

50T

100T

保存温度

蛋白酶K(10mg/ml)

1ml

2ml

-20℃

结合液

25ml

50ml

RT

漂洗液(RNase free)

15ml

15ml×2

2-8℃

玻璃奶

1.25ml

2.5ml

2-8℃

洗脱缓冲液(RNase free)

10ml

10ml

2-8℃

原理简介本试剂盒适合于从血清、细胞上清、淋巴液中提取RNA病毒基因组,也可用于DNA病毒基因组的提取。本试剂盒利用蛋白酶K破开病毒外壳,放出RNA/DNA,用玻璃奶吸附达到纯化目的。使用本试剂盒提取的RNA/DNA可用于各种常规操作,包括RT-PCR、文库构建、Southern杂交等实验。

注意事项1.一般病毒含量过低,zui后提取的基因组RNA/DNA电泳无法检测到,但RT-PCR/PCR等其他实验还会有结果。2.同一样本,如果想大量提取,可以增加样本量,并且每一步试剂加量,但使用次数会成倍减少。3. 所有离心步骤用低温离心机在4℃条件下离心,如果实验室没有低温离心机,也可以使用常温离心机,但所提得的RNA可能会降解严重些。

操作步骤准备工作:使用前请先开启一瓶新的无水乙醇,倒入漂洗液中,倒满至离瓶口约0.5-1ml,盖上瓶口,摇匀。1、 取病毒上清液0.5ml,12000rpm离心5min,尽量取上清使用,弃去沉淀。2、 向病毒上清中加入20ul 10mg/ml的蛋白酶K,充分混匀,65℃消化10-20min,期间可颠倒离心管混匀数次。3、 向管中加入500ul结合液,充分混匀。4.玻璃奶摇匀。加入25ul摇匀的玻璃奶,混匀,室温放置2分钟,10000转/分钟离心1分钟,去上清;沉淀加入800ul漂洗液,振荡混匀,10000转/分钟离心1分钟,去上清,再用600ul漂洗液洗一次。去上清,再次离心2分钟,用小吸头吸去上清。7.室温放置10分钟,加入30-50ul洗脱缓冲液混匀溶解,静置5分钟。离心,取上清为所提RNA。

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