核酸电泳和印迹 核酸印迹 核酸印迹膜 Zeta-Probe GT 膜

2024-03-20

Zeta-Probe GT(经过染色体 DNA 测试)膜用于敏感的染色体应用。 和原始 Zeta-Probe 膜一样,这些是高拉伸强度的阳离子尼龙膜,可携带高密度季胺类电荷。 这些柔韧易弯的膜在转移、杂交或重新标记过程中不易收缩、撕裂和变脆。

Zeta-Probe GT 膜可以结合核酸而不受缓冲液 pH 的影响,因此可用于快速碱性 DNA 印迹或 RNA 印迹方法以及传统 DNA 印迹。 这些膜可在低离子强度缓冲液中结合核酸,从而使通过电泳转移琼脂糖和丙烯酰胺凝胶中的核酸成为可能。 通过位点应用,至多 6 个碱基的寡核苷酸将结合到膜中,并且在重复的杂交和清洗步骤后,其中至少会保留 20 个碱基长。

每一批 Zeta-Probe GT 膜都进行了功能测试,以确保可以使用放射性标记探针在 5 µg 总染色体 DNA 中检测到 3 pg 目标单拷贝第八因子人 DNA。 在杂交前,可通过两种不同的方式生成这些印迹: 标准的高盐 (10x SSC) Southern 转印和 4 小时的碱性转印 (0.4 N NaOH)。 在质量控制过程中,使用第八因子 cDNA 克隆(单拷贝基因探针)探测 5 和 10 µg 溶解的人染色体 DNA。 这分别与仅有 1.5 和 3.0 pg DNA 的实际目标尺寸相对应,在暴露一夜后,这些 DNA 会直观显现。 Bio-Rad 质量控制程序还包括为期 3 天的暴露,以检查有无非特异性背景。 Zeta-Probe GT 膜随附有用于说明特定批次的结果的性能证书,上面包含试验概述和原始自动射线照片。

参考

Gatti RA et al. (1984). DNA 印迹的多种用途。 Biotechniques 2, 148-155.

Li JK et al. (1987). 实现病毒 dsRNA 的快速碱性印迹转印。 Anal Biochem 163,210-218。


Zeta-Probe® GT Membrane, 20 x 20 cm

1620194

Pkg of 15, 20 x 20 cm, genomic DNA-tested, high-strength nylon membrane positively charged with quaternary amine groups

  

Zeta-Probe® GT Membrane, 7 x 10 cm

1620208

The 7 x 10 cm Zeta-Probe GT Membrane is now discontinued, and the 10 x 15 cm Zeta-Probe Membrane is recommended as an alternative product.


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