HCT116 (人结肠癌细胞) 高效率转染shRNA，相当于9000bp左右质粒DNA

使用第三代转染试剂，美国ZetaLife Advanced Transfection reagent

HCT116 (人结肠癌细胞)转染效率荧光图

一、HCT116 (人结肠癌细胞)shRNA转染步骤：

转染步骤图示

1、合成shRNA时请带荧光，若shRNA不带荧光、请使用荧光对照，方便查看转染效率

2、shRNA浓度：20uM/L

3、shRNA和转染试剂复合物制备：shRNA取8ul和转染试剂取8ul，吹打混匀室温静置15分钟，无需另外加入任何试剂稀释

4、细胞转染前状态：拍10和20倍镜细胞明场照片留存

5、贴壁细胞铺板：6孔板完全培养基2ml、培养基中不加双抗，细胞密度：60%左右

6、转染：将复合物加入后轻摇混匀、放入培养箱培养

7、换液：合计转染24小时后培养基换液

8、转染效率：总计转染48小时后拍荧光照片，查看转染效率

9、转染后细胞状态：拍10和20倍镜细胞明场照片留存

10、检测：转染48小时后提取RNA或蛋白检测