微滴式数字PCR检测服务

2023-05-22

数字PCRddPCR检测服务微滴式数字PCR平台


微滴式数字PCR是能够精准记录DNA分子个数的第三代PCR。将反应体系分成上万个微滴,对每个微滴的荧光信号进行检测,最终用专用分析软件计算出待测样品的绝对定量值。


微滴式数字PCR (ddPCR) 属于第三代PCR技术,可对 DNA或 RNA 分子采用绝对定量的方式进行分析。采用数码化的阅读方式直接给出核酸分子的浓度,不再依赖Cq值或内参基因,不再需要标准曲线,即可确定低至单拷贝的待检靶分子的绝对数目,实现真正意义上的绝对定量,特别适合于检测基因组拷贝数变异。

 

数字PCR (ddPCR) 技术原理

数字PCR( 也可称单分子PCR)包括两部分内容:PCR 扩增和荧光信号分析。在PCR扩增阶段,与传统技术不同,数字PCR需要将样品稀释到单分子水平,并平均分配到几十至几万个单元中进行反应。不同于qPCR对每个循环进行实时荧光测定的方法,数字PCR技术是在扩增结束后对每个反应单元的荧光信号进行采集。最后通过直接计数或泊松分布公式计算得到样品的原始浓度或含量。数字PCR的定量方法不依赖于扩增曲线的循环阈值,因此不受扩增效率的影响,也不必采用看家基因和标准曲线,具有很好的准确度和重现性,可以实现绝对定量分析。


数字PCR (ddPCR) 技术特点

(1)最准确、最灵敏的数字 PCR 解决方案

(2)灵活的测定设置,可通过扩展实现高度的灵敏性或较大的通量

(3)简便而易用的工作流程,通量达 96 个样品

(4)微滴划分功能可减少扩增效率和 PCR 抑制剂的影响

(5)便捷的测定设计,不需要标准曲线


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