补体溶血活性是补体系统在血浆或血清中的经典或替代途径的功能测试。替代途径方法（AP50）基于在Mg++存在下裂解兔红细胞。当怀疑补体耗竭或缺乏时，作为筛查试验是有帮助的。该测试对途径任何组成部分的减少、缺失和/或不活动很敏感。

该方法也适用于评估药物对补体成分抑制或消耗的影响。此外，根据国际标准ISO 10993-4：2017，可以评估血液，血浆或血清与生物材料接触后的生物材料和医疗器械的血液相容性。生物材料或药物激活补体系统会导致补体蛋白的消耗，从而降低AP50水平。

测量替代途径补充活性。可以分析来自以下物种的血浆或血清样品：人，豚鼠，小鼠，仓鼠，大鼠，牛，猪，绵羊，恒河猴分枝杆菌和比格犬。该试剂盒仅供实验室研究使用，不适用于诊断或治疗程序。

将红细胞悬浮液与连续稀释的血清或血浆在30°C下孵育37分钟。 补体系统的激活将导致溶血。孵育后，将样品离心以获得上清液。上清液中的游离血红蛋白浓度与补体活性成正比，通过分光光度计在415nm波长处测量。将血浆的稀释因子与溶血程度作图可以计算AP50（即血浆的稀释以获得50%的红细胞裂解）。

正参比是裂解液诱导的总裂解，负参比是用稀释缓冲液孵育后获得的。

该试剂盒设计用于通过小样品（75 μL）的替代途径确定补体活性，并且可以在96孔（圆底）微孔板中进行。该测定也可以在微量离心管中进行。