SMS-KCNR细胞SK-N-SH Cell神经母细胞瘤传代培养

2023-06-01

Cell复苏后贴壁Cell较少的问题分析:总结1:复苏过程没有问题,是否是从液氮拿出直接放入温水,还有培养箱,二氧化碳浓度,培养基、PH值等环节。要么加高浓度FBS 15-20%,看看能否帮助贴壁,当然也需要考虑血清问题,还有确信拿来的Cell没问题。总结2:首先应该怀疑冻存,实际上复苏出问题的可能非常小,因为操作简单,而且死板。1、你冻存的时候是不是消化的时间过长,这是一般所注意不到的,即使书上也不讲这个问题,太长的消化时间会让Cell复苏时失去贴壁能力,表现为先贴后死,原因是在你复苏的时候Cell已进入凋亡程序,不可逆转的死亡。2、你的冻存液好不好,是什么,甘油还是DMSO,质量非常重要,否则也会死亡。3、你的冻存液的量加的是不是太多,ATCC推荐是不超过7%,大于5%,太多也不好。4、你在冻存的时候是不是把DMSO混均匀,这个有一些影响,但不算太大。5、你的冻存是否按部就班,就是所温度梯度是不是把握严格,很多容易忘却这个事情,因为这个东西流程长。6、如果你Cell污染,你是否能很快看到,我比我的导师能早一天看到污染。从这个角度讲建议去除离心这步。7、你的Cell在冻存前是否过密。还有,不赞成孵箱污染这个概念的,所有在一个孵箱里的Cell都污染一个细菌的话,这个细菌是源于孵箱的,但这不代表孵箱污染,因为孵箱无论你如何处理都有大量的细菌,问题在操作。每次污染的原因都要尽可能的找,以后就不犯同样的问题,这个很重要,不能靠猜,否则你就有可能Cell养绝最后换课题,这个见得太多了,别不当会事。


Cell来源说明:Cell主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系


Cell生长特性:悬浮生长

HT144Cell;Cell背景资料:详见相关文献介绍;Cell传代方法:1:3-1:8传代,2-3天换液1次。;Cell生长特性:贴壁生长;Cell形态特性:成纤维Cell;相关Cell有:PCI-4.2Cell、COLO829Cell、HEK 293-HCell

SK-N-SH Cell神经母细胞瘤传代培养


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