动物组织/细胞/昆虫总RNA快速提取试剂盒91218-试剂-金山科研平台

动物组织/细胞/昆虫总RNA快速提取试剂盒91218

2025-08-03

FlashPure Plus Tissue/Cell/Insect Total RNA Mini Kit动物组织/细胞/昆虫总 RNA 提取试剂盒（带 gDNA 过滤器）

动物组织/细胞/昆虫总RNA快速提取试剂盒

目录号：91218

产品内容

自备试剂

无水乙醇

保存条件

室温（15~25℃），有效期 12 个月。

产品简介

适用于快速提取各种动物组织、细胞、昆虫的总RNA，gDNA过滤器高效滤除gDNA，RNA可直接用于RT，RT-PCR，RT-qPCR，普通转录组测序、RACE 等。

产品特点

1. 无毒：免氯仿、免β-巯基乙醇！

2. 高质：28s/18s=2:1，OD260/280=2.0～2.2！

3. 高效：提取全过程仅需 10 min！

重要提示：

① 第一次使用前，请先在漂洗液RW中加入无水乙醇，详见标签。

② 所有离心步骤均需要在室温（15~37℃）下进行。

③ 高丰度样本（肝脏、脾脏、肾脏、胰腺、心脏）的投入量减半。

操作步骤：

1. 动物组织、昆虫：

a．电动匀浆：取新鲜组织 10~20 mg 加入 350μl的裂解液ARL Plus，电动匀浆，直到无明显组织块即可。

b．液氮研磨：在液氮中研磨组织成细粉，取10~20 mg组织细粉加入350μl裂解液ARL Plus，剧烈涡旋振荡20sec，充分裂解。

注意：裂解 20~30 mg 组织，需要加入 600 μl 裂解液 ARL Plus。

c．将匀浆后裂解物13，000 rpm 离心3min。

d．下接步骤 3。

2. 细胞

a．悬浮细胞：收集<107悬浮细胞到一个 1.5ml 离心管；

贴壁细胞（培养皿培养）：wan全吸弃培养基后，直接在培养皿中加入裂解液ARL Plus进行消化、裂解；

贴壁细胞（细胞瓶培养）：应该先用胰蛋白mei消化后吹打下来收集。

b．13,000rpm 离心10sec，wan全吸弃上清，留下细胞团。

c．轻弹管底使细胞松散，然后加入350μl（<5x106 细胞）或600μl（5x106-1x107细胞）裂解液ARL Plus，涡旋振荡，充分混匀。

d．下接步骤 3。

贴壁细胞培养数量表：（细胞数量＞1x107，请酌情增加裂解液的用量）

3. 将裂解物上清或者裂解物全部加到gDNA 过滤器上（过滤器放在收集管内），立刻 13,000 rpm 离心1 min，保留滤液（RNA 在滤液中）。

4. 向滤液中加入等体积（350μl/600μl）的70%乙醇，吹打混匀。

5. 每次吸取≤750μl滤液混合物转入一个RNA吸附柱中（吸附柱放入收集管中），13,000 rpm离心1min，倒弃滤液。此时，RNA被吸附在膜上，重复此过程，直到溶液全部上柱。

6. 加入700μl去蛋白液 RW1,室温放置 1min,13,000 rpm 离心30sec，倒弃滤液。

7. 加入500μl漂洗液 RW，13,000 rpm 离心30sec，倒弃滤液。

8. 重复步骤7。

9. 把RNA吸附柱放回收集管中，13,000rpm 离心2min，che底除去膜上的乙醇。

10. 取出RNA吸附柱，放入一个RNase-free 1.5ml离心管中，向吸附膜的中央部位悬空滴加30-50μl RNase-Free H2O，室温放置1min，13,000rpm离心1min。

11. 得到的RNA，可直接用于下游实验，或于-70℃保存，以免降解。

附录：

一、免液氮直接研磨（自动研磨仪）——适用于新鲜样本

a. 在2.0ml 液氮研磨管中加入4mm两粒，加600μl裂解液ARL plus，放进20mg左右的样本，设置65个频率，震荡2min。

b. 将裂解物13,000rpm离心3min，沉淀不能裂解的碎片。

二、液氮研磨（自动研磨仪）:

a. 把研磨模块丢到液氮中预冷，直到没有气泡冒出视为预冷完毕。

b. 在2.0ml液氮研磨管中放入3mm钢珠3粒，放进20-30mg 样本，投入液氮中预冷。

c. 把预冷好的离心管插入研磨模块中，放进研磨仪，设置 55 个频率，震荡30~60sec。（以北京赫得研磨仪——京 N9548 为例）

d. 研磨完成后，马上加600μl裂解液ARL Plus，剧烈涡旋振荡,充分混匀。

e. 将裂解物13,000rpm离心3min，沉淀不能裂解的碎片。