微量DNA浓缩回收试剂盒核酸提取43016

2025-08-03

DNA Purification micro Kit

微量DNA 浓缩回收试剂盒

微量DNA浓缩回收试剂盒 核酸提取

目录号:43016

产品内容:

自备试剂:

无水乙醇

保存条件:

室温(15~25℃)

产品简介:

本试剂盒为超微量 DNA浓缩回收的专用试剂盒。适用于微量 DNA的琼脂糖凝胶 DNA回收、PCR反应产物纯化回收、酶切产物 DNA片断纯化回收、探针标记后纯化回收、DNA样品浓缩等。使用本产品可回收 100bp-5kb大小的 DNA片段,回收率可达 85%-95%。该试剂盒操作简便,得到的DNA片段可用于酶切、连接、测序等实验。

产品特点:

1.特殊微量 5μg离心柱设计可以zui低 5μl洗脱,保证了回收 DNA的高浓度。

2.特殊无垫圈离心柱的设计,最大限度减少了无液体残留和污染,保证了回收 DNA的高纯度。

3.快速:步骤少,操作简便,整个操作仅需 15分钟。

注意事项:

1.BufferBL 的加入能够改善吸附柱的吸附能力并提高吸附柱的均一性和稳定性,消除高温潮湿或其他不良环境因素对吸附柱造成的影响。收到货后 2 个月内,不用做柱平衡。

2.使用前请先检查Buffer BL、Buffer DB 是否出现浑浊,如有混浊现象,可在 37℃水浴中加热几分钟,即可恢复澄清。

3.切胶时,紫外照射时间应尽量短,以免对 DNA造成损伤。

4.回收率与初始 DNA量和洗脱体积有关,初始量越少、洗脱体积越小,回收率越低。

操作步骤:

第一次使用前,请先在 BufferWB中加入无水乙醇,并打对勾标记,加入体积请参照瓶上的标签。

一、从琼脂糖凝胶中回收DNA片段

1.柱平衡:向吸附柱中(吸附柱放入收集管中)加入 50ulBufferBL,12,000rpm离心 1min,弃滤液,将吸附柱重新放回收集管中。(请使用当天处理过的柱子)

2.切胶:在长波紫外灯下,用干净刀片将目的 DNA条带切下,尽量切除不含 DNA的凝胶。

3.称重:将切下的含有目的 DNA条带的凝胶,放入 1.5ml离心管中,称取凝胶重量(去除空管重量)。如果凝胶重量为 100mg,其体积可视为 100ul。

4.溶胶:加入 3倍体积 BufferDB,56℃水浴,直到凝胶wan全溶解,期间颠倒混匀 2次加速溶胶。

(如果凝胶浓度大于 2%,应加入 6倍体积 BufferDB。对于回收<100bp的小片段,可在凝胶wan全溶解后,再加入 1.5倍胶块体积的异丙醇以提高回收率。)

5.吸附:待溶液冷却至室温后加入吸附柱中,室温静置 1min,然后 12,000rpm离心 30sec,弃滤液。

(如果总体积超过 750ul,可分 2次将溶液加入同一离心吸附柱中)

6.漂洗:加入 300ul漂洗液BufferWB,12,000rpm离心 30sec,弃滤液。

7.二次漂洗:重复操作步骤 6。

8.干燥:将吸附柱放回收集管中, 12,000rpm离心 2min,甩干膜上残留的乙醇,防止其抑制下游反应。

9.回收:将离心吸附柱置于一个新的 1.5ml离心管中,在微量吸附柱的膜中央加入 10ul(5~25ul)洗脱液Buffer EB,室温放置 1 min,12,000 rpm 离心 1 min。

(注意:为增加回收效率,可将洗脱液在 65℃预热,也可将得到的溶液重新加入到离心管中,室温放置 1 min,再次离心收集。)

微量DNA浓缩回收试剂盒 核酸提取

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